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PAS染色法
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日期：2007-01-18 11:02:54
点击：150 评论：0
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| 用 途 反应用来显示糖元和其它多糖物质 操作步骤 1. 固定液:用Carnoy液或75%酒精 Carnoy固定液: 纯酒精 60 ml 冰醋酸 10ml 氯仿 30ml 2. 染色液 1) 过碘酸酒清夜配法: 过碘酸(HIO .2H O) 0.4g 95% 酒精 35ml M/5醋酸钠(2.72g+蒸馏水100ml) 5ml蒸馏水10ml 保存于冰箱内, |
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密度梯度离心基础
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日期：2007-01-18 10:38:22
点击：374 评论：0
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| 概论 转头选择 密度梯度选用 一、 概论 在密度梯度离心中单一样品组份的分离是借助于混合样品穿过密度梯度层的沉降或上浮来达到的。梯度液的密度随着离心本经的增大而增加。密度梯度可以予形成，也可以在离心过程中自形成，经常，密度梯度的可以分为：速率一区带（Rate |
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细胞培养培养基
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日期：2007-01-15 00:24:25
点击：166 评论：0
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| 基础培养基 绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上，添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物，其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸，维生素的范围亦很广，另外常规 |
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细胞培养中的一些试剂
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日期：2007-01-15 00:22:50
点击：138 评论：0
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| 一、纺锤体阻断剂 （ Spindle inhibitor ） 在有丝分裂过程中，随着纺锤丝的形成，染色体被牵引到一起难以观察其形态。纺锤体的形成在于细胞质和纺锤体成分的粘度之间的平衡，因此，改变细胞质的粘度，即可破坏纺锤体形成，从而使得染色体均匀散开，且染色体缢痕区更为 |
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细胞生长的ATP检测[荧光素酶法]
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日期：2007-01-14 00:36:37
点击：107 评论：0
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| ATP反应液（Bio-Orbit）是粉末状混合物，含有荧光素、荧光素酶、0.5mmol醋酸镁、50mg BSA和0.1μmol无机焦磷酸。在4℃可以保存1个月。用前用10ml含2mmol/L EDTA的0.1mol/L pH7.75 Tris-醋酸缓冲液稀释。稀释液分装后可在－20℃长期保存。 2．在已经完成促增殖或抑生长试 |
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线粒体荧光探针大全：TMRM，Mitotracker，JC-1
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日期：2007-01-14 00:33:36
点击：84 评论：0
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| 线粒体荧光探针信息大全 （Probes for Mitochondria）包括各种常用探针，如JC-1，JC-9，TMRM，TMRE等 Mitochondria are found in eukaryotic cells, where they make up as much as 10% of the cell volume. They are pleomorphic organelles with structural variatio |
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线粒体肿胀检测方法
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日期：2007-01-14 00:27:35
点击：91 评论：0
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| Estimating Mitochondrial Mass，可以用于线粒体肿胀的检测 Accurate measurements of mitochondrial mass require a probe that will accumulate in mitochondria regardless of the mitochondrial membrane potential, a property displayed by several of our MitoT |
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细胞生长检测2：MTT检测法
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日期：2007-01-14 00:25:39
点击：302 评论：0
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| MTT 检测法 1．取96孔细胞培养板，每孔中加0.1ml含2×10 4 ～10×10 4 靶细胞的培养液（含10％小牛血清的RPMI-1640培养液），在37℃ 5％ CO 2 的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养2～3小时让细胞帖壁（如果是悬浮细胞可直接进行下一步） 2．用RPMI-1640培养液2～10倍递次稀 |
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细胞生长检测3：XTT检测法
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日期：2007-01-14 00:24:06
点击：126 评论：0
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| XTT 检测法 用XTT代替MTT可省去溶解还原产物结晶的步骤，XTT可以被活细胞中的代谢酶还原成黄色水溶性的代谢产物（formazan）。代谢产物在OD 450 处有吸收峰。 |
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细胞生长检测4：MTS检测法
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日期：2007-01-14 00:22:20
点击：115 评论：0
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| MTS 检测法 1．培养IL-2依赖细胞株CTLL-2细胞或HT-2细胞（检测IL-2），或者IL-3依赖细胞株FDC-P1细胞或FL5.12细胞（检测IL-3）到对数生长期。 2．取96孔细胞培养板，每孔加0.1ml含1×10 4 ～2×10 4 上述细胞之一的DMEM培养液（加10％小牛血清）。 3．每孔加0.1ml系列 |
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细胞生长检测5：NAG检测法
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日期：2007-01-14 00:18:38
点击：90 评论：0
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| NAG 检测法 1．按MTT检测法培养细胞和用不同稀释度的细胞因子处理细胞。 2．吸去培养液，用PBS洗涤两次（如为悬浮细胞，应在吸去上清液前先离心）。 3．每孔加60μl NAG染液，在37℃ 5％ CO 2 的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养4小时。 4．每孔加90μl终止液，混匀后置酶 |
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细胞生长检测6：AlamarBlueTM摄入法
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日期：2007-01-14 00:16:35
点击：168 评论：0
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| AlamarBlue TM 摄入法 1．按MTT检测法培养细胞和用不同稀释度的细胞因子处理细胞。 2．在培养结束前24小时加入Alamar Blue染料，96孔细胞培养板每孔20μl。 3．在培养结束后，直接在酶联检测仪上测定光吸收值。氧化型Alamar Blue的最大光吸收在570nm，用OD 570 减去OD |
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细胞生长检测7：碱性磷酸酶检测法（AKP法）
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日期：2007-01-14 00:12:44
点击：128 评论：0
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| 碱性磷酸酶检测法（ AKP 法） 1．按MTT法用细胞因子处理靶细胞适当时间，用PBS洗去死亡细胞，洗两次。 2．向96孔细胞培养板各孔中加0.2ml新鲜配制的底物液（0.2mol/L 硼酸，1mmol/L MgCl 2 ，1.2mmol/L甲伞基磷酸）。在37℃ 5％ CO 2 的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养3 |
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细胞生长检测8：三磷酸腺苷检测法（ATP法）
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日期：2007-01-14 00:09:59
点击：97 评论：0
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| 三磷酸腺苷检测法（ ATP 法） 1．ATP反应液（Bio-Orbit）是粉末状混合物，含有荧光素、荧光素酶、0.5mmol醋酸镁、50mg BSA和0.1μmol无机焦磷酸。在4℃可以保存1个月。用前用10ml含2mmol/L EDTA的0.1mol/L pH7.75 Tris-醋酸缓冲液稀释。稀释液分装后可在－20℃长期保存 |
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细胞生长检测9：染料染色法测定细胞数
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日期：2007-01-14 00:07:35
点击：102 评论：0
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| 染料染色法测定细胞数 1 ）结晶紫检测法 1．在96孔细胞培养板各孔中加0.1ml含5×10 4 ～10× 4 WEHI-164细胞的培养液（含10％小牛血清的RPMI-1640培养液），37℃ 5％ CO 2 的二氧化碳培养箱中培养2～3小时，让细胞帖壁。 2．用RPMI-1640培养液10倍递次稀释TNF标准品， |
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