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附录B 测定PLATINUMTM pfx DNA聚合酶的保真度
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日期:2007-06-19 08:15:34
点击:112 评论:0
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| PLATINUM pfx DNA聚合酶是一种高保真DNA聚合酶,特别适用于克隆和突变。PLATINUM pfx DNA聚合酶的保真性有两种分析来确定,rpsL保真度分析和LacZ保真度分析,并与其它聚合酶相比较。 当测定DNA聚合酶的保真度时,保真度数据的变化可能来自不同的分析过程,由于目标中的 |
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附录C 使用一步法RT-PCR从单一细胞中检测基因
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日期:2007-06-19 08:14:46
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| 方法: 分离单一细胞 在去除了细胞培养基后,COS-7细胞用不含钙镁的DPBS(0.20g/L KCl, 0.20g/L KH2PO4, 8.00g/L NaCl, 2.16g/L Na2HPO4·7H2O)清洗一次。加入Trypsin-EDTA(0.25% tryspsin,1mM EDTA·4Na)到细胞中(3ml/75cm2培养瓶)并保温至最多5分钟。加入20ml生长 |
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RT-PCR实验步骤
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日期:2007-06-19 08:13:28
点击:229 评论:0
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| 一、组织抽提: 1. 取组织块50-100㎎用液氮在研钵中研磨成粉末 2. 移入玻璃匀浆器加入1ml Trizol 抽打匀浆 3. 移入1.5ml新离心管用5 ml针头抽打 4. 冰上孵育5分钟 5. 离心12,000g 4℃ 5分钟 取上清液移入1.5ml新离心管 6. 加0.2 ml氯仿,震荡,冰上孵育5分钟 7. 离心12 |
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PCR扩增技术
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日期:2007-06-18 22:22:36
点击:82 评论:0
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PCR的基本原理
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日期:2007-06-18 22:22:35
点击:85 评论:0
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PCR循环参数
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日期:2007-06-18 22:22:34
点击:80 评论:0
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PCR实用技巧
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日期:2007-06-18 22:22:29
点击:51 评论:0
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