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一 目的要求: 1、练习果蝇幼虫的解剖技术及果蝇唾腺染色体的制片方法。 2、观察果蝇的唾腺染色体。
二 实验原理: 唾腺染色体是一类存在于双翅目昆虫幼虫唾液腺内的巨大染色体,由于染色体DNA经过多次复制,但并未发生细胞核分裂,重复复制后的染色线聚集在一起,因此比一般的染色体大的多。同时,唾腺细胞中的染色体总是处于配对状态,因此在果蝇唾腺细胞只能看到体细胞染色体数目的一半。 研究证明,多线染色体的带纹与某些特定的基因相联系,由于多线染色体上的带纹清晰可数,因此巨染色体是遗传学上研究染色体形态结构和染色体畸变的好材料。
三 操作步骤:
1、取材(图y-4) 取一张载玻片放在双筒解剖镜下,滴一滴生理盐水,将幼虫放在生理盐水内。两手各握一枚解剖针,一枚钉住幼虫末端的1/3处固定幼虫,另一枚解剖针钉住幼虫头部,前拉,把头部自身体拉开,可看到唾腺,剔除唾腺周围的脂肪及其它物质。 2、固定染色 吸去生理盐水,滴数滴盐酸,水解5分钟,吸去盐酸,滴1-2滴醋酸洋红染液,固定染色10~20分钟。 3、制片、镜检 盖上盖玻片,压片观察。(图y-5) 一般在一个唾腺细胞中能看到5条长臂的染色体,分别为X染色体、第二对染色体的左臂(L)、右臂(R)、第三对染色体的左臂(L)、右臂(R),这5条染色体臂由染色中心发射出来。这是由于第四对染色体相当小看不清,Y染色体浓缩,X染色体的着丝点位于端部只有一条臂之故。
四 作业: 1、制作果蝇巨染色体装片 2、画出你所观察到的果蝇巨染色体
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