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实验十四 细菌荚膜、芽孢的观察
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发布时间：2006-12-05
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细菌荚膜对染料的亲和力很低，不易着色，因此常用负染色法进行染色。所谓负染色法就是用有色的背景将不着色的部分衬托出来。负染色法常用的染液是黑色素染液。
细菌芽孢不易着色，因此在染色时需要加热。
一 实验目的
掌握细菌荚膜、芽孢染色的基本技能。
二 实验材料
菌种：钾细菌斜面（28℃下培养一周）、苏芸金杆菌斜面（37℃下培养21小时左右）。
染液：藏花红染液、黑色素染液、孔雀石绿染液。
三 实验内容：
(一) 荚膜染色
1. 在洗净的载玻片中央滴一滴蒸馏水，用接种针挑取少量钾细菌，涂匀后，微热固定。
2. 滴一滴藏花红染液，染2分钟，水洗。
3. 待未干时，滴二滴黑色素染液，用吸水纸边缘将染液刮成一薄膜，自然干燥活微热烘干。
4. 用高倍镜或油镜观察背景黑色，菌体红色，荚膜不着色。
(二) 芽孢染色
1．制作苏芸金杆菌涂片，微热固定。
2．滴几滴孔雀石绿染液并放在正在沸腾的水浴锅盖上加热10分钟，这时需要不断添加染液，以免变干，水洗，烘干。
3．用藏花红复染1分钟，水洗，烘干。
4．用油镜观察菌体红色、芽孢绿色、伴孢晶体绿色、孢子囊为红色，其中的芽孢为绿色。
附：染料配制（点击展开）
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