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显微放射自显影
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发布时间：2007-03-24
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一、实验目的 1. 了解显微放射自显影的基本原理 2. 掌握显微放射自显影的基本方法步骤二、实验原理放射自显影技术是利用放射性同位素所产生的射线作用于感光乳胶的氯化银晶体而产生潜影，再经过显影定影处理，把感光的氯化银还原成黑色的银颗粒，即可根据这些银颗粒的部位和数量分析出标本中放射性示踪物的分布，以进行定位和定量分析。三、实验用品器具：显微镜、恒温培养箱、电冰箱、干燥箱、电吹风、暗室试剂：酒精、二甲苯、Giemsa染色液、乳胶、显影液、定影液、3H－TdR 材料：小白鼠四、实验内容及方法 1. 同位素标记 将3H－TdR注射到小白鼠的腹腔中 2. 制片 标记3－4小时后，处死小白鼠，将取出组织并固定4小时左右，然 后进行切片 3. 涂乳胶 在暗室中把乳胶涂在载玻片上，直立于盒内，在暗处凉干 4. 曝光 将凉干的切片放入暗盒，盒内放入少量干燥剂，用黑纸封严，放在4摄氏度冰箱中曝光10－14天 5. 显影、定影 6. 染色 用Giemsa染色液染色10－15分钟。自来水冲洗、凉干 7. 观察 在显微镜下观察同位素在细胞中的分布
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