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Western Blotting
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日期：2007-10-26 08:56:23
点击：43 评论：0
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| Western Blotting or immunoblotting (Western blotting was dubbed because it is similar to Southern blotting which was invented by and named after the inventor E. M. Southern) allows investigators to determine, with a specific primary antibody, the re |
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蛋白质单晶培养的15种方法
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日期：2007-10-26 08:54:56
点击：60 评论：0
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| 1）大量养晶法（bulkcrystallization）：若急着养出单晶，则将纯化之蛋白质溶液加入固体盐类或饱和盐液，直到溶液中出现乳白混浊色，离心后把上清液（suppernatant）放置数天至数周，有可能养出单晶。 （2）批次养晶法（batchmethod）:若发现加入蛋白质的沉淀剂和盐类 |
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植物蛋白质提取方法总汇
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日期：2007-10-26 08:52:50
点击：100 评论：0
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| 一、植物组织蛋白质提取方法 1、根据样品重量（1g样品加入3.5ml提取液，可根据材料不同适当加入），准备提取液放在冰上。 2、把样品放在研钵中用液氮研磨，研磨后加入提取液中在冰上静置（3-4小时）。 3、用离心机离心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃ 4、提取上清液 |
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蛋白质纯化介质选择
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日期：2007-10-26 08:50:56
点击：96 评论：0
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| 一、生物大分子色谱纯化方法的选择思路 1. 凝胶过滤色谱。 2. 离子交换色谱。 3. 疏水色谱。 4. 亲和色谱 二、主要用途介绍 1. 去除内毒素 2. 去除核酸 3. 纯化硫酸铵沉淀样品 4. 糖蛋白的纯化 5. 膜蛋白分离 6. 纯化抗体和抗原 7. 纯化重组蛋白 8. 疫苗的纯化 9. DNA |
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磁性微球在蛋白质和多肽的分离与纯化上的应用
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日期：2007-10-26 08:49:54
点击：68 评论：0
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| 传统方法难以对蛋白质进行分离且保持其活性，但采用连在磁珠上的单克隆抗体进行免疫沉淀富集，SDS-PAGE电泳法检测则可达想要结果。用磁珠分离细胞溶菌液中的蛋白质，几乎不需要预先处理，与其他方法相比，非特异性结合也较少。 要从全血，培养上清液，血清，腹水中分离 |
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浅述蛋白质分离纯化的新技术
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日期：2007-10-26 08:47:23
点击：134 评论：0
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| 摘 要： 本文主要介绍了浊点萃取法、置换色谱法、亲和层析法、亲和色谱法、凝胶电泳、双水相萃取等蛋白质的最新分离纯化技术，综和近年来国内外的一些研究结果，结合实际应用的例子，分析了各种分离纯化方法的优点，同时指出其不足之处。文章最后展望了蛋白质分离纯化 |
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蛋白质提取与纯化技术
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日期：2007-10-26 08:42:56
点击：112 评论：0
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| 选择材料及预处理 以蛋白质和结构与功能为基础，从分子水平上认识生命现象，已经成为现代生物学发展的主要方向，研究蛋白质，首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识，但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物 |
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蛋白质的浓缩技术
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日期：2007-10-26 08:39:50
点击：51 评论：0
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| 蛋白质浓缩技术是免疫学中常用的手段，现介绍几种常用的浓缩技术。 （一）透析袋浓缩法 利用透析袋浓缩蛋白质溶液是应用最广的一种。将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋（无透析袋可用玻璃纸代替），结扎，把高分子（6 000－12 000）聚合物如聚乙二醇（碳蜡）、聚乙烯吡咯、 |
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SDS-PAGE测定蛋白质分子量及蛋白质的纯度鉴定
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日期：2007-10-14 01:45:26
点击：249 评论：0
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| 实验目的与原理 蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时，它的迁移取决于它所带电荷以及分子大小和形状等因素。1967年Shapiro等人发现，如果在聚丙烯酰胺系统中加入阴离子去污剂十二烷基磺酸钠(SDS),大多数蛋白质能与SDS按一定比例结合，即每克蛋白质结合1.4g的SDS－复合物都 |
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蛋白质含量测定法
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日期：2007-10-14 01:27:46
点击：129 评论：0
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| 本实验的目的是学会各种蛋白质含量的测定方法。了解各种测定方法的基本原理和优缺点。 蛋白质含量测定法，是生物化学研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四种古老的经典方法，即定氮法，双缩尿法（Biuret法）、Folin －酚试剂法（Lowry法）和紫外吸收法 |
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蛋白质的含量测定与纯度鉴定
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日期：2007-10-14 01:25:40
点击：460 评论：0
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| 书接前言，蛋白分离纯化后首先要做的就是目的蛋白含量的测定及纯度的鉴定。 蛋白含量测定的方法 ： 1. 凯氏定氮法 经典的标准方法，但现在已不多用。 2. 双缩脲法 与硫酸铜－氢氧化钠溶液发生颜色反应。 3. Lowry法（Folin－酚试剂法） 多年来的蛋白标准测定方法，近年 |
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免疫印迹（Western blotting）
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日期：2007-09-23 11:46:15
点击：720 评论：0
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| western blot原理 western blot实验方法 western blot操作步骤 western blot步骤 western blot方法 western blot技术 |
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电泳和Western转印的常见问题
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日期：2007-09-23 11:37:15
点击：215 评论：0
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| 问 题 可能原因 建议解决方法 推荐电压条件下电泳时间过长。 电泳缓冲液过� � 配制新鲜缓冲液，使用1X稀释液。 推荐电压条件下电流过高，热量过大。 电泳缓冲液过� � 配制新鲜缓冲液，使用1X稀释液。 推荐电压条件下电流过低或无电流。 接触不良。 在电泳前移除胶盒底 |
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Westernblot实验步骤及注意事项
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日期：2007-09-23 11:35:17
点击：374 评论：0
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| Westernblot 实验步骤 1. 组织块称重 2. 利用液氮、研钵粉碎组织块 3. 加入RIPA缓冲液（每克组织3 ml RIPA），PMSF（每克组织30μl，10 mg/ml PMSF），利用Polytron进一步匀浆（15,000转/分*1分钟）维持4℃ 4. 加入PMSF（每克组织30μl，10 mg/ml PMSF），冰上孵育30分 |
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使用胶做western blot的方法
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日期：2007-09-23 11:32:20
点击：143 评论：0
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| 在经典的Western Blot的世界里，蛋白电泳—转膜—封闭—抗体—显色这个五步骤环环相扣，构成WB完整过程，就象砌积木一样，少了前面一步的基础后面的就砌不上去。但是亲爱的朋友，告诉我，你们在一次又一次重复这个貌似简单又颇为费时的实验时，有没有设想过能省略掉其 |
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