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色谱技术基础
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日期:2006-12-10 11:38:08
点击:144 评论:0
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| 色谱法,又称层析法。根据其分离原理,有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等方法。 吸附色谱是利用吸附剂对被分离物质的吸附能力不同,用溶剂或气体洗脱,以使组分分离。常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、聚酰胺等有吸附活性的物质。 分配色谱是利用溶液中被分离 |
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气相色谱法的新进展及发展方向
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日期:2006-12-10 11:35:04
点击:106 评论:0
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| 1、仪器方面的最新进展 *自动化程度进一步提高,特别是EPC(电子程序压力流量控制系统)技术已作为基本配置在许多厂家的气相色谱仪上安装(如HP6890,ShimadzuGC-17AGC-2010, Varian3800,PEAutoXL,CEMega8000等),从而为色谱条件的再现、优化和自动化提供了更可靠 |
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功能蛋白质组学研究的有力工具:Ettan DIGE荧光差异蛋白表达分析系统
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日期:2006-12-10 11:32:18
点击:141 评论:0
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| 原理和应用: EttanDIGE荧光差异蛋白表达分析系统在传统双向电泳技术的基础上,结合了多重荧光分析的方法,在同一块胶上共同分离多个分别由不同荧光标记的样品,并第一次引入了内标的概念,极 大地提高了结果的准确性,可靠性和重复性。在DIGE技术中,每个蛋白点都有它 |
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蛋白质组鉴定技术
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日期:2006-12-10 11:31:19
点击:113 评论:0
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| 如果目前分离 蛋白质组 的最好技术是2-DE,那么随之而来的挑战是数百数千个蛋白如何被鉴定.在这里,我们不考虑传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析,或者在一个有机体中有意义的基因的过表达.并不是因为这些方法无效, |
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蛋白质组学-质谱分析
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日期:2006-12-10 11:28:08
点击:210 评论:0
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| ProteomicsPrimer 1.Proteomics 2.2-DPAGE 3.ImmobilisedpHgradients(IPGs) 4.Massspectrometry 5.Principlesofmassspectrometry 6.Matrixassistedlaserdesorption/ionisation(MALDI) 7.Electrosprayionisation 8.MassAnalysers?-Time-of-flightanalysers 9.MassAnalys |
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原核表达操作步骤及注意事项
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日期:2006-12-10 11:15:09
点击:133 评论:0
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| 将 克隆 化基因插入合适载体后导入大肠杆菌用于表达大量蛋白质的方法一般称为原核表达。这种方法在蛋白纯化、定位及功能分析等方面都有应用。大肠杆菌用于表达重组蛋白有以下特点: 易于生长和控制;用于细菌培养的材料不及哺乳动物细胞系统的材料昂贵;有各种各样的大 |
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薄层层析操作要点
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日期:2006-12-08 09:21:35
点击:219 评论:0
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| 铺板 铺板用的匀浆不宜过稠或过稀:过稠,板容易出现拖动或停顿造成的层纹;过稀,水蒸发后,板表面较粗糙。匀浆配比一般是硅胶G:水=1:2~3,硅胶G:羧甲基纤维素钠水溶液=1:2。研磨匀浆的时间,根据经验来定,与空气湿度有关,一般通过拿起研棒时匀浆下滴的情况来判断 |
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蛋白质提取与纯化技术
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日期:2006-12-08 09:18:49
点击:255 评论:0
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| 选择材料及预处理 以蛋白质和结构与功能为基础,从分子水平上认识生命现象,已经成为现代生物学发展的主要方向,研究蛋白质,首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识,但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物 |
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蛋白定量技术
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日期:2006-12-08 09:15:59
点击:164 评论:0
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| 一)双缩脲测定法 1.原理蛋白质中的肽键有双缩脲反应,在碱性溶液中与二价铜离子形成蓝紫色的络合物,在一定的范围内,颜色的深浅与蛋白质的含量成正比。此法特异性强,游离的氨基酸、小肽和核酸均不产生这种反应,但此法不够敏感,仅能测出毫克水平。 2.试剂配制 硫 |
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原核表达操作步骤及注意事项
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日期:2006-12-07 10:12:47
点击:304 评论:0
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| 将 克隆 化基因插入合适载体后导入大肠杆菌用于表达大量蛋白质的方法一般称为原核表达。这种方法在蛋白纯化、定位及功能分析等方面都有应用。大肠杆菌用于表达重组蛋白有以下特点: 易于生长和控制;用于细菌培养的材料不及哺乳动物细胞系统的材料昂贵;有各种各样的大 |
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聚丙烯酰胺凝胶电泳分离过氧化物同工酶
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日期:2006-12-02 10:29:53
点击:527 评论:0
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| 一、目的 同工酶是指能催化同一种化学反应,但其酶蛋白本身的分子结构组成却有所不同的一组酶。研究表明,植物在发育过程中,所含同工酶的种类和比例都不相同,它们与植物的遗传、生长发育、代谢调节及抗性等都有一定关系,因此作为基因表达的产物,测定同工酶谱是认识 |
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免疫印迹(Western blotting)
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日期:2006-12-02 01:46:21
点击:314 评论:0
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| 实验题目 :免疫印迹(Westernblotting) 教 师:XXX 实验类型: 综合 学时 :16 (参考) 内容 : 一、 实验目的 : 免疫印迹主要用于蛋白质的结构和活性检测等方面,学生掌握与免疫印迹相关的原理和方法,如电泳技术,转膜技术等。 二、 实验原理 : 蛋白质印迹 (Weste |
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蛋白纯化经验指南
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日期:2006-11-22 12:15:34
点击:1105 评论:1
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| 原创:Chromatographyweixingui@263.net, 推荐书籍:《蛋白纯化与实验鉴定指南》、《生物工程下游技术》、《酶工程》、《酶制剂工业》 1)我现在手头有个融合蛋白,纯化的时候用助溶剂溶解后做了GST亲和层析,之后用蛋白酶切割后却发现目的蛋白没有活性。 请问有哪些可 |
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