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siRNA的转染
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日期：2008-03-05 12:07:45
点击：47 评论：0
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| 将制备好的siRNA，siRNA表达载体或表达框架转导至真核细胞中的方法主要有以下几种： 1.磷酸钙共沉淀 将氯化钙，RNA(或DNA)和磷酸缓冲液混合，沉淀形成包含DNA且极小的不溶的磷酸钙颗粒。磷酸钙-DNA复合物粘附到细胞膜并通过胞饮进入目的细胞的细胞质。沉淀物的大小和质 |
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RNA干扰常见问题与解答
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日期：2007-12-06 09:40:26
点击：167 评论：0
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| 问： RNA 干扰各种方法的优缺点如何？ 答：各种常用方法的优缺点如下： (1) 化学合成 dsRNA ：优点：快捷，通常 6 － 8 天内就可以从供应商处拿到定制的 RNA oligo 。 (2) 体外转录 dsRNA ：优点：价格相对低廉。缺点：操作困难、耗时。 (3)PCR 制备编码 shRNA 的转录 |
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调控基因表达的 miRNA
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日期：2007-12-06 09:37:32
点击：309 评论：0
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| micro RNAs (miRNAs) 是一类长约22核苷酸的非编码的单链 RNA 分子，它们广泛存在于从植物、线虫到人类的细胞中。最早发现的是 lin-4 和它的靶 mRNA，即 lin-14。1993年，Lee 等人用经典的定位克隆的方法在线虫 (C. elegans) 中克隆了 lin-4 基因，并通过定点突变发现 l |
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RNAi的发现简史
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日期：2007-11-07 01:40:33
点击：125 评论：0
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| RNAi是与靶基因序列同源的双链RNA (dsRNA)所诱导的一种特异性基因沉默现象。它是真核生物中存在的一种抗病毒入侵、抑制转座子活动、调控基因表达的监控机制，具有重大生物学意义。 90年代初，Rich Jorgensen 设想，将更多的色素基因注入植物体，能使花朵的色彩更艳丽， |
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RNAi的实验原理与方法
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日期：2007-11-07 01:39:31
点击：278 评论：0
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| 近年来的研究表明，将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞，可以使mRNA发生特异性的降解，导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被称为RNA干扰（RNAi）。 一、RNAi的分子机制 通过生化和遗 |
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RNAi的实验原理与方法
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日期：2007-11-07 01:38:47
点击：222 评论：0
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| (三)siRNA的转染 将制备好的siRNA，siRNA表达载体或表达框架转导至真核细胞中的方法主要有以下几种： 1.磷酸钙共沉淀 将氯化钙，RNA(或DNA)和磷酸缓冲液混合，沉淀形成包含DNA且极小的不溶的磷酸钙颗粒。磷酸钙-DNA复合物粘附到细胞膜并通过胞饮进入目的细胞的细胞质。 |
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RNAi技术的应用
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日期：2007-11-07 01:37:31
点击：152 评论：0
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| 功能基因组和遗传学应用 随着各种模式生物和人类基因组测序的完成，基因功能的研究远远落后于大量序列所提供的信息，研究和发现基因功能成为越来越紧迫的任务。长期以来，破坏基因结构或抑制基因表达是研究基因功能的重要方法，如常用的基因敲除技术( gene knock out) |
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siRNA治疗癌症的最新进展
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日期：2007-09-20 08:18:00
点击：147 评论：0
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| 德克萨斯州大学M.D.Anderson癌症中心的一项新研究显示，装载在一种微小的脂肪球中的一种分子开关（siRNA）能够渗入卵巢癌肿瘤细胞中“掐死”一种讨厌的蛋白并明显缩小肿瘤的尺寸。这项研究的结果刊登在8月15日的ClinicalCancerResearch杂志上。这项研究还成为该期杂志 |
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siRNA、miRNA在内分泌代谢病领域中的研究及应用
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日期：2007-09-20 08:15:20
点击：240 评论：0
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| 小干扰RNA(siRNA)和微小RNA(miRNA)是两类序列特异性的转录后基因表达调控因子,是小RNA家族中最主要的成员,两者在结构特征、形成过程、作用机制等方面既有相似,亦有不同。它们通过RNA干扰(RNAi)所引发的转录后基因沉默(PTGS)可高效、特异性地调控靶基因的表达。RNAi是生 |
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siRNA表达框架
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日期：2007-09-20 08:09:28
点击：112 评论：0
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| siRNA表达框架(siRNA expression cassettes，SECs)是一种由 PCR 得到的siRNA表达模版，能够直接导入细胞进行表达而无需事前 克隆 到载体中。这个方法最早是由Castanotto和其同事采用，包括一个RNA polⅢ启动子，一段发夹结构siRNA，一个RNA pol III终止位点。与siRNA表 |
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siRNA用户手册
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日期：2007-09-20 08:07:16
点击：79 评论：0
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| The siRNA user guide (revised May 6, 2004) Selection of siRNA duplexes from the target mRNA sequence Using Drosophila melanogaster lysates (Tuschl et al. 1999), we have systematically analyzed the silencing efficiency of siRNA duplexes as a function |
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RNAi在细胞培养中的应用
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日期：2007-09-20 08:02:38
点击：85 评论：0
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| The protocols listed here are for Drosophila cells in 6 well plates and our pre-aliquoted 384 well plates. RNAi experiments may be done in other size plates, just scale up or down. Adopted from Clemens et al., PNAS 2000 vol 97(12): 6499-6503 I. 6-We |
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体外合成siRNA的设计
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日期：2007-09-20 08:01:51
点击：120 评论：0
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| 如何设计有效的siRNA一直是当前 RNAi 研究的热点话题.基因抑制的有效性很大程度取决于目的基因序列的选择。目的序列可以随机选择也可以通过在目的基因的不同区域上测试不同的序列以决定何种序列是最有效的。以下所述几条对于siRNA设计的成功极为重要。 1. 从转录本（mRN |
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RNAi起源与专有名词
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日期：2007-09-20 07:59:07
点击：212 评论：0
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| RNAi起源 首次发现ds RNA 能够导致基因沉默的线索来源于线虫Caenorhabditis elegans的研究。 lang=EN-US1995年，康乃尔大学的Su Guo博士和 lang=EN-USKemphues在试图阻断秀丽新小杆线虫（C. elegans）中的par-1基因时，发现了一个意想不到的现象。她们本是利用反义 RNA |
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RNAi实验原理与方法选择
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日期：2007-09-20 07:58:09
点击：297 评论：0
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| 近年来的研究表明，将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞，可以使mRNA发生特异性的降解，导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被称为RNA干扰（RNAi）。 一、RNAi的分子机制 通过生化和遗传 |
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